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精液细胞学检查的临床应用及意义

2008-09-05
    随着男性学领域研究工作的不断开拓,评价男性生育力的各项检测手段日益列新。精液中生精细胞学检查也愈来受到人们的重视。应用光学显微镜辨认经离心沉淀和瑞一姬染色后的精液细胞形态是医学检验技师的基本功。笔者在检验科和病理科工作。对细胞形态有一定研究,目前,精液细胞形态开展工作,扬州地区大概就是苏北人民医院和江都市妇幼保健院。
1.1 病例  我院从2006-2006不育男性约186例
1.2 标本  手淫取精  标本的采集是精液细胞学检查的基础,也是精液细胞学染色成败的关键之一。和精液常规检查相比主要不同点:生精细胞的收集,等留取的精液化后,500离心10分钟,弃上清PH7.4的PBS洗涤2次,每次500r/分钟离心5分钟最后的沉定物即为含有精液细胞的标本。
2、(一)苏木紫-伊红染色法
(1)、 原理  核酸带有磷酸基,其等电点PH1.5~2.0。当PH值>2.0时,核酸带负电荷,能结合带正电荷的碱性染料苏木素而呈紫蓝色,伊红为酸性染料,能与细胞质中具有相反电荷的蛋白质结合,使胞质呈红色。
(2)、操作方法
①涂片置95%乙醇和乙醚混合液(1:1)中固定15分钟;
②乙固定的涂片流水洗2分钟,蒸馏水洗1 分钟;
③苏木紫液染色约5 分钟(视着色情况增减);
④水洗,1%盐酸分钟钟化,显微镜下控制;
⑤流水浸洗至少15分钟钟。
⑥伊红液染1-2分钟钟后,95%乙醇2次,无水乙醇2次,每次约1-2分钟钟浸洗;
⑦二甲苯2次,每次3-5分钟钟;
⑧用中性树胶封片。
3、讨论 精液细胞学检查的临床意义
正常精液中也可有一定数量的畸形精子,一般在20%左右;如超过40%就会影响到精液质量,超过50%常可导致不育。感染、外伤、睾丸应激、高温、放射线、酒精中毒、药物、激素失调或遗传因素均会增加畸形精子的百分钟钟率。用精液进行生精细胞学检查来取代睾丸活动检是一项有价值的工作,对生精细胞形态学检查的结果,从生精细胞存在异学、形态异常、比例异常等方面分钟钟析,探讨其临床价值及其临床意义。
①存在异常  无论生育在不育男性精液中均存在着精子和(或)生精细胞, 若精液中找不到精子及生精细胞等有形成分钟钟,即为生精细胞存在异学,其临床表现为精子症。一类是由于睾丸曲细精管的基膜发生障碍,在精原细胞生育阶段就发生障碍,导致无精子症,属于原发性睾丸生精障碍,治疗上比较困难;另一类是输精管道阴塞,即睾丸的精子发生正常,但却不能排出体外。
②形态异常  在60岁以上老年人精液中可见到衰老的生精细胞,肾功能衰竭和酒精性肝硬变的患者精液中可找到形态导演的生精细胞。细胞毒类对男性生殖细胞形态的影响明显。温度对生精细胞形态学变化亦颇为明显,对热最敏感的生殖细胞有精母细胞和精子细胞。
③比例异学  常见睾丸不育原因是生精细胞成熟停滞。许多药物能影响睾丸的精子发生,特别是各种化疗手对生精细胞的影响更为突出,如杂环类化合物硝基咪唑类药物主要抑制初级精母细胞与早期精子细胞,但对静止期精母细胞不发生作用。在临床上,根据生精细胞的类型可进一步衡量睾丸生精功能,为分钟析睾丸病因提供了客观指标,为无精子症、少精子症的病因分钟析提供了科学依据。同时动态观察精液生精细胞的变化,可以作为男性不育症疗效观察和判断预后的指标之一。
目前,精液染色体在男性学也有重要作用,但是基层单位由于人员设备限制,不易开展。目前,分钟钟子生物学原理和技术在男性学业中的应用日益受到重视,也是今后的发展方向。但是,在细胞水平尤其是光学显微镜下的形态描述和识别,当前与今后仍然是医学检验中常用的方法。也是比较简便易行的方法。
笔者由于是在妇幼保健院工作,相对来说有专科特色,通过这些精液细胞形态学的检查,并且与临床相结合,在不增加仪器设备的情况下,对广大患者提供一下切实可行的服务,这也为解决当前看病贵的问题,作出一点贡献。
 
参考文献
[1]徐维衡,医学遗传学基础,北京医科大学出版社,2000.18-19.
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