试管婴儿胚胎冷冻

不孕症病人进行“试管婴儿”的治疗过程中，一般会借助排卵药物的刺激来获得十个以上的成熟卵子，但每个治疗周期为了避免多胞胎的危险性，只能有1-3个胚胎移植入子宫腔（卫生部文件明确规定每周期移植胚胎总数不得超过3个，其中35岁以下妇女第1次助孕周期移植胚胎数不得超过2个）。因此剩余的胚胎需要进行冷冻保存。如果在本次治疗的周期没有成功妊娠，保存的胚胎可以在以后的自然排卵周期移植回母体，不必再进行超促排卵，不但可免除打针的痛苦，也可节省不少费用。因而胚胎冷冻技术极为重要。

胚胎冷冻技术是利用冷冻保护剂将胚胎保存在超低温环境中（通常是-196℃的液氮中），当需要时再将胚胎解冻，复温到正常温度后进行移植的技术。

1983年Trounson等首先将胚胎的冷冻一解冻技术用于人类胚胎，并成功妊娠。目前，世界上已普遍开展了胚胎的冷冻和复苏技术。实验室常用的胚胎冷冻方法有慢速程序化冷冻和玻璃化冷冻。

胚胎的慢速程序化冷冻保存是使用一定浓度的冷冻保护剂和经程序冷冻仪缓慢降温来实现细胞的逐步脱水。冷冻保存的关键是设法减少细胞内冰晶对胚胎造成的损伤。此时细胞的代谢活动被完全抑制,使细胞的生命在静止状态下保存下来,而得以在超低温环境中永久保存。

玻璃化冷冻胚胎的方法1985年Rall和Fahy提出的，玻璃化冷冻是胚胎及其高浓度的冷冻保护剂溶液以足够快的降温速率，过冷到所谓玻璃化转变温度，而被固化成完全的玻璃态，并以这种玻璃态在低温下保存。由于这一过程中，细胞内外完全避免了结晶，从而得以避免通常的平衡冻结方法中，由于结冰可能引起的各种损伤。

传统的慢速程序化冷冻在临床已使用20余年，虽经不断改进，解冻存活率仍在70％左右。玻璃化冷冻不需要程序化冷冻仪，且简便、快速，仅数分钟即可完成，消耗液氮量少。近年来，玻璃化冷冻法经过不断的改进，逐渐替代常规慢速冷冻方法，已逐渐广泛应用于辅助生殖实验室。数据显示玻璃化冷冻卵裂期胚胎、囊胚和卵子解冻后的存活率均高于慢速冷冻方法，从而极大地提高了临床妊娠率。

冷冻胚胎的移植一般情况下，融解胚胎移植时都要求子宫内膜的发育与胚胎年龄同步化，通常采用自然周期对冷冻胚胎进行移植，也可采用激素刺激周期（无排卵）和人工周期。在自然周期，一般在排卵第3-5天进行胚胎移植；在无排卵或月经周期不规则的患者，常使用激素替代治疗。

冷冻胚胎一般需进行辅助孵化，因为胚胎冻融可使部分卵裂球衰亡、透明带硬化而影响胚胎的孵化和着床。应用激光技术，在胚胎移植前使透明带变薄，使胚胎发育至囊胚阶段，容易脱出透明带与子宫内膜融合。

影响冻融胚胎移植结局的因素很多，包括患者年龄、冷冻胚胎的质量、内膜准备方式和冷冻方法等。目前玻璃化冷冻胚胎解冻移植妊娠率可达40-50%。

冷冻胚胎贮存若保存环境良好，一般时间可长达数年之久。

胚胎冷冻技术还可应用于本治疗周期母体因子宫环境不适合怀孕 (例如：发生严重卵巢过度刺激征或子宫内膜不佳)，也可先冷冻保存暂缓植入，待适当的时机再做解冻。此外,对于因病情所迫接受卵巢切除､化疗､放疗等病人以及因卵巢功能早衰而不育的病人,均可应用此技术低温保存胚胎或卵子供日后妊娠使用｡