白细胞总数正常时中性粒细胞VCS参数分析

      感染性疾病最常见的实验室检查是白细胞总数及分类计数和血培养检查，前者更为方便快捷，它对于疾病的诊断、治疗以及预后的判断有着重要的临床意义。以往较为传统的根据细胞体积大小进行分类的电阻抗分析技术并不能真实全面地反映白细胞的情况。随着新技术发展，市场上推出的各型五分类细胞分析仪采用了多种新的分类方法如激光散射、荧光染色等，而Beckman Coulter 公司的LH750型血细胞分析仪采用了Coulter专有VCS技术，可以比较直观地了解到白细胞的体积（V）、浆核比例（C）和细胞内颗粒（S）的变化,提高了分类结果的可靠性。关于VCS改变已有相关报道^[1]，但都侧重于白细胞总数增高时的改变，对白细胞总数在正常参考范围的中性粒细胞VCS的变化却无相关报道。在临床工作中由于个体对感染因素反应性、疾病病程的发展等多种原因，这一类患者也不少见，往往可能出现漏诊。基于这种原因我们观察了78例白细胞总数正常的感染患者中性粒细胞VCS的变化，现报道如下。

1.1仪器及试剂

采用Beckman Coulter LH750全自动血液分析仪及其原装配套试剂，奥地利格利纳公司含EDTA-K2抗凝剂的2ml真空采血管，日本产奥林巴斯光学显微镜，温州市康泰生物科技有限公司生产的瑞氏-姬姆萨氏染液。

1.2受试对象

感染组：本院收治的呼吸道、胆道系统感染患者，其白细胞总数在4?10*10⁹/L，共78人,其中男性53人，女性25人，年龄55-80岁，同时排除血液系统疾病。对照组：临床体检的健康者92人，其中男性60人，女性32人，白细胞总数和分类计数比率均在正常范围内，其年龄、性别构成与感染组相似。

1.3    方法：

按测定要求收集受试者空腹静脉血2．0ml于EDTA-K2抗凝剂的真空采血管中并颠倒充分混匀，2小时内上机完成分析，仪器每日分析前均做本底及5C质控，检测指标在控后进行标本测试。每个标本检测后收集中性粒细胞的VCS参数，同时制成血片，干燥后瑞氏-姬姆萨氏染色，由检验师进行读片。

1.4统计学处理

所有数据以±SD表示，SPSS11.0软件t检验进行统计分析，P<0.05为差异有统计学意义。

2.1感染组VCS的变化

健康对照组与感染组中性粒细胞的VCS统计结果见表1。由表1可见细胞体积的V值

组  别    n        NEV              NEC             NES

对照组    92     148.3±5.31        142.3±3.25      149.6±4.60

感染组    78     155.1±12.14*     140.9±7.32**     147.8±8.60**

* 与对照组比较，P <0.01，**与对照组比较，P <0.05

较对照组明显升高，P <0.01有明显的统计学意义。而反映浆核比例的C值和胞内颗粒的S值均表现为降低，P <0.05，有统计学意义。2.2感染组中性粒细胞比率与VCS间的关系

感染组按中性粒细胞比率进一步分组，＜70%为一组、70-80%为一组、81-90%为一组、大于91%为一组，各组间的比较结果见表2。表中可见V值随着中性粒细胞比率升高逐渐增高，当中性粒细胞比率＜70%时V值与健康对照组相比就有统计学意义。反映细胞成熟度的浆核比例C值和反映细胞内颗粒变化的S值均呈现出逐渐下降的趋势，提示细胞幼稚化和毒性变化。此时将各个标本制成血片瑞氏染色，油镜下观察中性粒细胞形态变化，当中性粒细胞比率在70-80%时有2例（5.7%）出现核左移，81-90%时有5例（19.2%）出现不同程度的核左移/中毒颗粒和空泡等中毒现象，超过90%时有5例（55.6%）核左移/中毒现象更为明显，这与常玉荣报道相符 ^[2]。

 

      表2结果提示感染患者当中性粒细胞的比率<70%时V值已经发生改变，且V值随着中性粒细胞百分率增高而逐渐增高。骨髓在细胞因子刺激下使得中性粒细胞被激活从而在血片中可以观察到中性粒细胞有核左移、中毒颗粒、空泡、大小不均和Dohle小体等病理性改变，故V值能较早的反映感染情况。

      正常血细胞发育过程的演变规律是中性粒细胞随着细胞逐渐成熟，浆核比由小变大^[3]。而表2可以明显的看出当中性粒细胞比率逐渐增高时C值反而逐渐减少，提示不成熟细胞逐渐增多，与本文血液涂片镜检结果相符。

     激光散射可探测细胞内核分叶和细胞浆颗粒（S）状况，通过分析光散射信息对细胞内颗粒进行分析。本文各比率组S值呈逐渐下降的趋势，这与吕美艳报道^[1]的结果相反但与Fernando  Chaves的报道一致^[4]。我们分析是由于中性粒细胞的体积加大，细胞内单位体积内的颗粒数相对减少，从而使细胞体内激光散射的离散度较前明显降低的缘故。

      一直以来，白细胞总数、中性粒细胞比率和绝对值计数、未成熟粒细胞的出现均可作为细菌感染的诊断指针，形态学改变如中毒颗粒、空泡和Dohle小体也对诊断有重要价值。由于个人正常状态下基础白细胞总数的水平不一，当机体发生局限性轻度感染以及患者对外界感染因素反映性较差如老年、恶异质及感染严重者时，往往会出现白细胞总数正常以至于低于正常，中性粒细胞的比率早期也可能在正常范围，为临床提供早期诊断指标显得尤其重要。Beckman Coulter LH750可对8000个以上白细胞的体积、内部成分的导电性、胞浆颗粒和核结构的散射性等特征进行综合评价分析，得到较为精确的白细胞分类结果^[5]。若能在疾病早期向临床提供中性粒细胞的VCS参数具有重要的参考价值。

[1]  吕美艳，王明山.细菌感染性疾病患者白细胞VCS参数的变化及临床意义[J]检验医学，2007，22（15）：578-580

[2]  常玉荣，石峻.血细胞形态学观察对血液系统疾病诊断的意义[J].检验医学,2007,22(1):78-80

[3]  王鸿利.血液学和血液学检验[M].北京:人民卫生出版社,1997:14-15

[4]  Chaves F, Tierno B, Xu DS. Quantitative determination of neutrophil VCS parameters by the Coulter automated hematology analyzer, new and reliable indicators for acuter bacterial infection. Am J Pathol,2005,124:440-444

[5]  Chaves F, Tierno B, Xu DS. Neutrophil volume distribution width a new automated hematologic parameter for acute infection. Arch Pathol Lab Med,2006,130(3):378-380